Annexin A10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406977

概要

ANXA10はアネキシンA10をコードしており、膜関連プロセスに関与するとされるCa²⁺およびリン脂質結合タンパク質であるアネキシンファミリーの一員です。アネキシンA10は、他のアネキシンに見られる典型的なCa²⁺結合特性の一部を欠くものの、上皮細胞の分化制御、膜輸送、ならびに組織恒常性に影響する細胞極性プログラムの制御との関連が報告されています。ANXA10の発現は特定の上皮環境で高く、粘膜系および腺系統に特徴的な転写状態と関連づけられています。ANXA10発現の破綻（異常）は複数のがん種で報告されており、分化の変化や腫瘍サブタイプの生物学を反映するマーカーとしてしばしば研究されています。

Annexin A10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるANXA10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ANXA10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ANXA10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Annexin A10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Annexin A10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ANXA10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Annexin A10の機能に不可欠なANXA10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ANXA10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Annexin A10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAnnexin A10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ANXA10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Annexin A10 HDRプラスミド（h）および Annexin A10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはANXA10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のANXA10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。