Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Androgen Receptor Double Nickase Plasmid (h): sc-400026-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Androgen Receptor Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Androgen Receptor Double-Nickase-Plasmid (h) und Androgen Receptor Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf AR abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Androgen Receptor: sc-7305
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Androgen Receptor Double Nickase Plasmid (h) | sc-400026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Androgen Receptor Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **AR** kodiert den Androgenrezeptor, einen ligandenaktivierten nukleären Hormonrezeptor, der als Transkriptionsfaktor wirkt und Programme steuert, die an Differenzierung, Proliferation und metabolischer Homöostase beteiligt sind. Nach Bindung von Androgenen transloziert AR in den Zellkern und bindet an Androgen-Response-Elemente, wobei er in Zusammenarbeit mit Chromatin-Remodellern und Ko-Regulatoren eine kontextabhängige Genexpression formt. Die AR-Signalgebung überschneidet sich mit PI3K/AKT-, MAPK- und DNA-Schadensantwort-Netzwerken und beeinflusst dadurch Zellzykluskontrolle und Stressanpassung. Eine fehlregulierte AR-Aktivität sowie veränderte Rezeptorvarianten werden mit androgenabhängigen Phänotypen in Verbindung gebracht und sind Gegenstand intensiver Forschung, insbesondere in der Prostatakrebsbiologie und bei endokrin bedingten Erkrankungen.
Androgen Receptor Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des AR-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von AR abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die AR-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit AR-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.