ALR CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403367

개요

인간 GFER는 간 재생 촉진인자(augmenter of liver regeneration, ALR)를 암호화하며, ALR은 주로 미토콘드리아 막간 공간에 위치하는 FAD 의존성 설프하이드릴 산화효소로서 산화적 단백질 접힘과 미토콘드리아 생합성을 지원한다. ALR은 MIA40/ERV1(CHCHD4/GFER) 이황화 결합 릴레이 내에서 기능하여 시스테인-풍부 단백질의 유입과 성숙을 돕고, 그 결과 호흡 사슬의 무결성, 산화환원 항상성, 세포 생존 프로그램에 영향을 준다. 이러한 역할을 통해 ALR은 에너지 대사, 활성산소종(ROS) 처리, 스트레스 반응 등 대사 기능장애 및 종양 관련 미토콘드리아 재구성에서 흔히 변화하는 과정들에 영향을 미친다. GFER/ALR의 조절 이상은 미토콘드리아 질환 표현형과 연관되어 왔으며, 단백질 유입 및 산화적 접힘 능력 저하와 관련된 더 광범위한 병리와도 연결된다.

ALR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GFER 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GFER 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GFER의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ALR 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ALR 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GFER 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ALR 기능에 중요한 GFER 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GFER 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ALR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ALR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GFER 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ALR HDR 플라스미드 (h) 및 ALR HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GFER 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GFER 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.