alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416366-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP1A3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Anticorpo (H-4): sc-365744
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416366-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416366-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP1A3 codifica a subunidade catalítica α3 da Na⁺/K⁺-ATPase, uma ATPase do tipo P que utiliza a hidrólise de ATP para trocar Na⁺ intracelular por K⁺ extracelular, mantendo o potencial de membrana e os gradientes iónicos. Esta bomba sustenta a excitabilidade neuronal, a recuperação do potencial de ação e processos de transporte ativo secundário que acoplam gradientes iónicos à captação de neurotransmissores e à regulação do volume celular. A atividade da ATP1A3 interage com vias que governam a homeostase eletroquímica, a sinalização sináptica e as respostas ao stress associado à demanda metabólica em tecidos excitáveis. Perturbações genéticas e funcionais de ATP1A3 estão associadas a fenótipos de doenças neurológicas, tornando-a um alvo fundamental para estudos mecanísticos da disfunção do transporte iónico e das suas consequências ao nível dos circuitos.
alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP1A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP1A3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP1A3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP1A3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.