alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-416366

概要

ATP1A3 は、ATP 加水分解を利用して膜を介した Na⁺ および K⁺ の勾配を維持する、細胞膜の P 型 ATPase である Na⁺/K⁺ 輸送 ATPase の触媒サブユニット α3 をコードしています。ATP1A3 は、静止膜電位の形成、活動電位の回復、二次輸送を通じて、神経の興奮性、イオン恒常性、ならびに興奮性組織におけるエネルギー共役に影響を与えます。その活性は、電気化学的勾配に依存するシナプス伝達、カルシウム制御、細胞ストレス応答などの過程と統合的に関わっています。ATP1A3 の遺伝学的・機能的な異常は神経疾患の表現型と関連しており、神経生理学およびイオン輸送機能障害の機構を検討するうえで有用な標的（ノード）となります。

alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるATP1A3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ATP1A3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ATP1A3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ATP1A3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3の機能に不可欠なATP1A3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ATP1A3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびalpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ATP1A3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 HDRプラスミド（h）および alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはATP1A3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のATP1A3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。