Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
AIM2 Plasmide Double Nickase (m): sc-436414-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- AIM2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il AIM2 Double Nickase Plasmid (m) e il AIM2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Aim2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: AIM2 Antibody (3C4G11): sc-293174
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
AIM2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-436414-NIC | 20 µg | $410.00 |
AIM2 (absent in melanoma 2) nel topo è un sensore citosolico del DNA a doppio filamento che avvia la segnalazione dell’immunità innata assemblando l’inflammasoma AIM2 con ASC, con conseguente attivazione della caspasi-1 e maturazione di IL-1β e IL-18. Attraverso la piroptosi dipendente dall’inflammasoma e il rilascio di citochine, AIM2 modella la difesa antimicrobica e regola il tono infiammatorio nei compartimenti mieloidi ed epiteliali. L’attività di AIM2 si interseca con le vie di risposta al danno al DNA e con quelle della risposta ospite–patogeno, influenzando le risposte al DNA citosolico proveniente da microbi o da cellule danneggiate. Una segnalazione disregolata dell’inflammasoma AIM2 è stata implicata in fenotipi infiammatori e autoimmuni, nonché nell’infiammazione associata ai tumori in modelli preclinici.
AIM2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Aim2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Aim2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Aim2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Aim2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.