Adenosine A3-R Double Nickase Plasmid (m): sc-419016-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Adenosine A3-R Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Adenosine A3-R Double-Nickase-Plasmid (m) und Adenosine A3-R Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Adora3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Adenosine A3-R Double Nickase Plasmid (m) | sc-419016-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Adora3** kodiert den Adenosin-A3-Rezeptor (Adenosine A3-R), einen über Gi/o gekoppelten GPCR, der extrazelluläres Adenosin erkennt und intrazelluläres cAMP sowie MAPK/ERK-Signale und PI3K-assoziierte Überlebenswege moduliert. Die Aktivierung von A3-R beeinflusst zudem die Phospholipase-C-Signalgebung, die Ca2+-Mobilisierung und das Gleichgewicht der Freisetzung pro- und antiinflammatorischer Mediatoren in Immun- und Stromakompartimenten. In murinen Systemen wird **Adora3** häufig im Kontext von Hypoxie und Gewebestress untersucht, bei denen Adenosin akkumuliert, und dabei die Rekrutierung von Leukozyten, den Gefäßtonus und die Barrierefunktion mitprägt. Eine fehlregulierte Adenosinrezeptor-Signalgebung wurde mit Mechanismen entzündlicher Erkrankungen, der nozizeptiven Verarbeitung und der Biologie der Tumor‑Immun‑Mikroumgebung in Verbindung gebracht, wodurch **Adora3** einen nützlichen Knotenpunkt für die Analyse von Signalwegen darstellt.
Adenosine A3-R Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Adora3-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Adora3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Adora3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Adora3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.