ADAR1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401611-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- ADAR1 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- ADAR1 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo ADAR1 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo ADAR1 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor ADAR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: ADAR1 Anticorpo (D-8): sc-271854
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAR1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-401611-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
ADAR1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h2) | sc-401611-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
ADAR (ADAR1) codifica uma adenosina desaminase que catalisa a edição de RNA A‑para‑I em regiões de RNA de dupla fita, remodelando sequências de transcritos, o splicing e interações dependentes da estrutura do RNA. Por meio da edição de dsRNA endógeno, a ADAR1 limita a ativação aberrante da imunidade inata ao reduzir o reconhecimento por sensores citosólicos de RNA e, assim, modula a sinalização de interferon do tipo I e programas gênicos inflamatórios. A ADAR1 também influencia o processamento de microRNAs e a recodificação de transcritos selecionados, impactando decisões de destino celular e respostas ao estresse. A atividade desregulada de ADAR1 e as paisagens de edição de RNA têm sido associadas a respostas antivirais alteradas e à patobiologia inflamatória, bem como à remodelação do transcriptoma associada ao câncer.
As Partículas de Ativação Lentivirais ADAR1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ADAR numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais ADAR1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ADAR, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ADAR1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ADAR e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.