ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406511

概要

ADAMTS16 は、ADAMTS ファミリーに属する分泌型の亜鉛依存性メタロプロテアーゼである ADAMTS-16 をコードしており、細胞外マトリックス（ECM）成分をタンパク質分解的に再構築して、組織構築を調節します。ADAMTS-16 は細胞周囲空間におけるプロテアーゼ活性を調整することで、ECM のターンオーバー、細胞—マトリックス間シグナル伝達、ならびに接着・遊走・分化プログラムに影響する微小環境シグナルに作用します。ADAMTS16 の発現や活性の変化は、マトリックスリモデリングの破綻が関与する状況、たとえば心血管・腎の生理、生殖生物学、腫瘍随伴性間質のリモデリングなどで検討されてきました。マトリックス関連プロテアーゼとして、ADAMTS-16 は ECM の組織化、プロテオリシス、組織界面における細胞シグナル伝達に関連する経路と併せて研究されることが一般的です。

ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADAMTS16遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADAMTS16内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADAMTS16のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAMTS-16タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAMTS-16シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADAMTS16欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAMTS-16の機能に不可欠なADAMTS16エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADAMTS16ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADAMTS16遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAMTS-16 HDRプラスミド（h）および ADAMTS-16 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADAMTS16ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADAMTS16標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。