ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406511

Übersicht

ADAMTS16 kodiert ADAMTS-16, eine sekretierte, zinkabhängige Metalloproteinase der ADAMTS-Familie, die Komponenten der extrazellulären Matrix (EZM) proteolytisch umgestaltet und die Gewebearchitektur reguliert. Durch die Modulation der Proteaseaktivität im perizellulären Raum beeinflusst ADAMTS-16 den EZM-Umsatz, die Zell‑Matrix-Signalübertragung sowie mikroenvironmentale Signale, die Programme der Adhäsion, Migration und Differenzierung steuern. Eine veränderte Expression oder Aktivität von ADAMTS16 wird in Zusammenhängen untersucht, in denen die Matrix-Remodellierung fehlreguliert ist, darunter die kardiovaskuläre und renale Physiologie, die Reproduktionsbiologie sowie die tumorassoziierte Umgestaltung des Stromas. Als matrixassoziierte Protease wird ADAMTS-16 häufig im Kontext von Signalwegen untersucht, die mit EZM-Organisation, Proteolyse und Zellsignalisierung an der Gewebegrenzfläche verbunden sind.

Das ADAMTS-16 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADAMTS16-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADAMTS16-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADAMTS16 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADAMTS-16-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADAMTS16-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADAMTS-16-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADAMTS16-Exone abzielen, die für die ADAMTS-16-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADAMTS16-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ADAMTS-16 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ADAMTS-16 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADAMTS16-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADAMTS-16 HDR-Plasmid (h) und ADAMTS-16 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADAMTS16-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADAMTS16-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.