ADAMTS-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405885

概要

ADAMTS15は、ADAMTSファミリーに属する分泌型の亜鉛依存性メタロプロテアーゼであるADAMTS-15をコードしており、マトリックス構成要素をタンパク質分解的に処理し、組織リモデリングを調節することで、細胞外マトリックス（ECM）の構築に寄与します。細胞周囲のプロテオグリカンおよびコラーゲンに富む微小環境を形成することにより、ADAMTS-15は、間質—上皮相互作用に関連する細胞接着、遊走、ならびにメカノトランスダクション経路に影響を与えます。ADAMTS15の活性変化は、軟骨や結合組織の恒常性、線維化に関連したリモデリング、腫瘍に関連するECM動態といった文脈で研究されており、そこでプロテアーゼ—阻害因子バランスの変動が浸潤能や転移能に影響し得ます。これらの特性により、ADAMTS-15は、ヒト細胞系におけるマトリックス代謝回転、微小環境シグナル伝達、プロテアーゼネットワークを検討するうえで有用なノードとなります。

ADAMTS-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADAMTS15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADAMTS15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADAMTS15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAMTS-15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAMTS-15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADAMTS15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAMTS-15の機能に不可欠なADAMTS15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADAMTS15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAMTS-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびADAMTS-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADAMTS15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAMTS-15 HDRプラスミド（h）および ADAMTS-15 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADAMTS15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADAMTS15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。