ADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418988

概要

Adam22は、神経系で高発現するADAMファミリーの触媒活性を持たない膜貫通タンパク質ADAM22をコードしており、シナプスにおける接着／足場（スキャフォールド）成分として機能します。ADAM22はLGI1およびシナプス後受容体と複合体を形成し、グルタミン酸作動性伝達、シナプス成熟、ニューロン興奮性を調節することで、樹状突起スパインの構築や回路の安定性に影響を与えます。これらの相互作用を介して、ADAM22は神経発達やネットワーク恒常性の中核となる、シナプスシグナル伝達経路および活動依存的可塑性に関与します。ADAM22–LGI1軸の制御異常は発作感受性や神経発達性の表現型と関連づけられており、Adam22は疾患関連モデルにおけるシナプス機能障害の機序解析に有用な標的となります。

ADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdam22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adam22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adam22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAM22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAM22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adam22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAM22の機能に不可欠なAdam22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adam22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adam22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAM22 HDRプラスミド（m）および ADAM22 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdam22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdam22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。