ADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405581

概要

ADAM22は、ディスインテグリンおよびメタロプロテアーゼドメインを含むタンパク質をコードします。このタンパク質は触媒活性を持たない一方で、神経系において細胞表面の接着因子およびシグナル伝達の足場（スキャフォールド）として機能します。LGIファミリーのリガンドと相互作用し、膜タンパク質複合体の調節を介して、シナプス接触の組織化、神経細胞の興奮性、ならびに軸索—グリア間コミュニケーションに寄与します。ADAM22に関連するネットワークは、シナプス成熟、イオンチャネルのクラスター形成、細胞外マトリックスに連結したシグナル伝達を制御する経路と交差します。ADAM22の発現や複合体形成の破綻は神経学的表現型と関連づけられており、シナプス機能不全や、それに関連する神経発達・神経精神疾患の機序の文脈で研究されています。

ADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADAM22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADAM22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADAM22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAM22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAM22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADAM22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAM22の機能に不可欠なADAM22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADAM22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびADAM22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADAM22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAM22 HDRプラスミド（h）および ADAM22 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADAM22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADAM22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。