Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ACTR-IIA Double Nickase Plasmid (h): sc-402524-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ACTR-IIA Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ACTR-IIA Double-Nickase-Plasmid (h) und ACTR-IIA Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ACVR2A abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ACTR-IIA: sc-515826
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ACTR-IIA Double Nickase Plasmid (h) | sc-402524-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACTR-IIA Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402524-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACVR2A kodiert den Activin-Rezeptor Typ IIA (ACTR‑IIA), einen transmembranären Serin/Threonin-Kinase-Rezeptor, der Activine und verwandte Liganden der TGF‑β-Superfamilie bindet, um die SMAD2/3-Signalübertragung zu initiieren. Über die Bildung von Rezeptorkomplexen mit Typ‑I-Rezeptoren reguliert ACTR‑IIA Transkriptionsprogramme, die Zellproliferation, Differenzierung, Apoptose, epitheliomesenchymale Dynamiken und die Homöostase der extrazellulären Matrix steuern. ACVR2A-abhängige Signalgebung trägt zur Gewebeentwicklung sowie zur Immun- und Entzündungsregulation bei, und Störungen dieses Signalwegs werden häufig im Zusammenhang mit fehlregulierter TGF‑β/Activin-Signalgebung untersucht. Genetische und signalwegbezogene Veränderungen unter Beteiligung von ACVR2A wurden in mehreren krankheitsassoziierten Kontexten beschrieben, darunter Krebs und gastrointestinale Erkrankungen, was seinen Wert als Knotenpunkt für mechanistische Signalweg-Analysen unterstreicht.
ACTR-IIA Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ACVR2A-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ACVR2A abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ACVR2A-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ACVR2A-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.