ACTR-IIA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402524-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTR-IIAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACTR-IIA (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACTR-IIA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACVR2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTR-IIA Anticorpo (D-9): sc-515826
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTR-IIA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402524-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACTR-IIA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402524-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACVR2A codifica o receptor de activina tipo IIA (ACTR-IIA), um receptor transmembranar serina/treonina quinase que se liga a activinas e a ligantes relacionados da superfamília TGF-β para iniciar a sinalização via SMAD2/3. Por meio da formação de complexos receptores com receptores do tipo I, o ACTR-IIA regula programas transcricionais que controlam a proliferação celular, a diferenciação, a apoptose, a dinâmica epitélio–mesenquimal e a homeostase da matriz extracelular. A sinalização dependente de ACVR2A contribui para o desenvolvimento tecidual e para a regulação imune e inflamatória, e perturbações nessa via são frequentemente estudadas no contexto de desregulação da sinalização de TGF-β/activina. Alterações genéticas e de sinalização envolvendo ACVR2A foram relatadas em múltiplos contextos associados a doenças, incluindo cânceres e distúrbios gastrointestinais, sustentando seu valor como um nó para a investigação mecanística de vias.
ACTR-IIA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACVR2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACVR2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACVR2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACVR2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.