ACSVL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405122-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACSVL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACSVL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACSVL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC27A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACSVL1 Anticorpo (D-7): sc-393906
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACSVL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACSVL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC27A2 codifica a acil-CoA sintetase de ácidos graxos de cadeia muito longa 1 (ACSVL1/FATP2), uma enzima associada à membrana que ativa ácidos graxos de cadeia longa e muito longa em tioésteres acil-CoA, permitindo seu direcionamento para a β-oxidação, a síntese de lipídios complexos e a remodelação lipídica. Ao controlar a captação de ácidos graxos e sua ativação intracelular, a ACSVL1 influencia o metabolismo lipídico mitocondrial e peroxissomal, a homeostase energética e as respostas celulares à disponibilidade de nutrientes. O manuseio desregulado de ácidos graxos envolvendo SLC27A2 tem sido estudado em fenótipos metabólicos como esteatose hepática e resistência à insulina, bem como em programas metabólicos lipídicos alterados relevantes para inflamação e a bioenergética de células tumorais. Essas propriedades tornam a ACSVL1 um nó útil para dissecar a sinalização impulsionada por lipídios e a reprogramação metabólica em modelos de células humanas.
ACSVL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC27A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC27A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC27A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC27A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.