ACE2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-427594-LAC

Das murine Ace2-Gen kodiert das Angiotensin‑konvertierende Enzym 2 (ACE2), eine Typ‑I‑Membran‑Zink‑Metallopeptidase, die das Renin‑Angiotensin‑System ausbalanciert, indem sie Angiotensin II in Angiotensin-(1–7) umwandelt. Über die Modulation der ACE/ACE2‑Signalgebung beeinflusst ACE2 GPCR‑gekoppelte Signalwege, die den Gefäßtonus, inflammatorische Signalprozesse, Reaktionen auf oxidativen Stress und die Gewebeumgestaltung regulieren. ACE2 wird in epithelialen und endothelialen Kompartimenten breit exprimiert und trägt zur homöostatischen Kontrolle der kardiovaskulären, renalen und pulmonalen Physiologie bei. Veränderte ACE2‑Expression oder ‑Aktivität wird mit kardiometabolischer Dysfunktion, entzündlicher Lungenschädigung und Wirt‑Pathogen‑Interaktionen in Verbindung gebracht und ist damit ein relevantes Ziel für mechanistische Untersuchungen krankheitsassoziierter Signalwege.

ACE2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ace2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ACE2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ace2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ACE2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ace2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.