ACAD-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432841
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACAD-9 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACAD-9, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACAD-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432841 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acad9 codifica o membro 9 da família das acil-CoA desidrogenases (ACAD-9), uma flavoproteína mitocondrial que sustenta a β-oxidação de ácidos gordos e é necessária para a montagem eficiente do complexo I da fosforilação oxidativa. Através dos seus papéis na transferência eletrónica mitocondrial e no metabolismo energético, a ACAD-9 influencia a homeostase redox, a produção de ATP e a flexibilidade metabólica em tecidos com elevada exigência. A disrupção da função de ACAD9 está associada a defeitos na montagem do complexo I e a fenótipos semelhantes aos de encefalomiopatia mitocondrial, tornando-a relevante para o estudo de falhas bioenergéticas, respostas ao stress metabólico e mecanismos de doença mitocondrial em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACAD-9 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acad9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acad9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acad9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACAD-9.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acad9 para a investigação da sinalização de ACAD-9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acad9 críticos para a função ACAD-9
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acad9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACAD-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACAD-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acad9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACAD-9 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACAD-9 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acad9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acad9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.