ABCG2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416737-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ABCG2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ABCG2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ABCG2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABCG2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ABCG2 Anticorpo (B-1): sc-377176
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ABCG2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416737-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABCG2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416737-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCG2 (também conhecido como BCRP) codifica um transportador de efluxo da família ABC (ATP-binding cassette) que limita o acúmulo intracelular de diversos xenobióticos e metabólitos endógenos. Localizado na membrana plasmática em populações celulares de barreira e com características de células-tronco, o ABCG2 contribui para o transporte epitelial, a desintoxicação celular e a proteção contra estresse oxidativo e químico por meio da exportação de substratos dependente de ATP. Sua atividade se cruza com o processamento farmacocinético e com programas de resposta ao estresse ao modular a exposição intracelular a pequenas moléculas e a metabólitos relacionados a porfirinas. A expressão ou função desregulada de ABCG2 é frequentemente estudada no contexto de fenótipos de resistência a múltiplos fármacos, da biologia de barreiras teciduais e da heterogeneidade tumoral, bem como de variantes hereditárias que afetam a atividade do transportador.
ABCG2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABCG2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABCG2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABCG2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABCG2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.