Plasmide Double Nickase (h) ABCD2: sc-405099-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABCD2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABCD2 Double Nickase (h) et le plasmide ABCD2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABCD2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABCD2 | sc-405099-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABCD2 | sc-405099-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCD2 code un transporteur de la famille des cassettes de liaison à l’ATP (ABC) localisé dans la membrane peroxysomale, qui importe des acyl-CoA d’acides gras à très longue chaîne en vue de la β‑oxydation peroxysomale. En soutenant le catabolisme lipidique et les échanges métaboliques entre peroxysomes et mitochondries, ABCD2 contribue à l’homéostasie lipidique cellulaire, à l’équilibre rédox et au remodelage des lipides membranaires. Son activité recoupe celle d’autres transporteurs ABC peroxysomaux, ce qui en fait un nœud clé des voies qui régissent la prise en charge des acides gras à très longue chaîne. La dérégulation du transport peroxysomal des acides gras et de la β‑oxydation est impliquée dans des contextes neuro-inflammatoires et neurodégénératifs et sert de cadre mécanistique pour étudier le stress lipidique lié aux peroxysomes.
ABCD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABCD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABCD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABCD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABCD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.