ABAT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404041-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ABATO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ABAT (h) e o Plasmídeo Double Nickase ABAT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABAT. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ABAT Anticorpo (B-12): sc-393769
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ABAT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404041-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABAT Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404041-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ABAT humano codifica a 4-aminobutirato aminotransferase (transaminase do GABA), uma enzima mitocondrial dependente de fosfato de piridoxal que catalisa o catabolismo do GABA a semialdeído succínico, ligando a renovação do neurotransmissor ao ciclo do ácido tricarboxílico por meio do desvio do GABA (GABA shunt). Ao regular os níveis intracelulares de GABA e o estado redox e o fluxo metabólico a jusante, o ABAT influencia a excitabilidade neuronal, a homeostase mitocondrial e o equilíbrio energético celular. A perturbação da atividade do ABAT está associada a alterações na neurotransmissão inibitória e a estresse metabólico, e o ABAT tem sido estudado no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e relacionados a crises epilépticas, bem como de disfunção mitocondrial mais ampla. Essas características fazem do ABAT um alvo útil para investigar o metabolismo GABAérgico, vias mitocondriais e relações genótipo–fenótipo em modelos celulares humanos.
ABAT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABAT em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABAT. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABAT. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABAT interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.