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A20/TNFAIP3慢病毒激活颗粒(h) | sc-400447-LAC | 200 µl | $455.00 |
TNFAIP3 编码 A20,这是一种含锌指的泛素编辑酶,作为炎症信号传导的核心负调控因子发挥作用。A20 通过调控 K63 连接和 M1 连接的泛素链,并促进关键接头蛋白的蛋白酶体周转,从而在 TNF 受体、Toll 样受体以及 IL‑1 受体通路下游终止 NF‑κB 的激活。通过这些作用,A20 限制细胞因子产生、细胞存活信号以及先天免疫激活,帮助维持组织稳态。TNFAIP3 的表达或功能失调与异常免疫反应相关,并被认为参与自身免疫和炎症性疾病的机制,同时也与某些恶性肿瘤中的信号依赖性有关。
A20/TNFAIP3 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TNFAIP3 表达。
A20/TNFAIP3 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TNFAIP3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性A20/TNFAIP3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TNFAIP3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。