非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
14-3-3 η双切口酶质粒(h): sc-402892-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- 14-3-3 η 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- 14-3-3 η双切酶质粒（h）和14-3-3 η双切酶质粒（h2）编码针对YWHAH的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：14-3-3 η: sc-293464，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
14-3-3 η双切口酶质粒(h) | sc-402892-NIC | 20 µg | $410.00 |
YWHAH 编码人源 14-3-3 η 适配蛋白，属于一个高度保守的蛋白家族。该家族可结合磷酸化丝氨酸/磷酸化苏氨酸基序，从而调控多种靶蛋白的定位、稳定性与活性。通过这些相互作用，14-3-3 η 整合并协调控制细胞周期进程、细胞凋亡、应激反应以及细胞骨架组织等关键环节的信号节点，并与 MAPK/ERK、PI3K–AKT 及其他由激酶驱动的通路密切相关。通过调节依赖磷酸化的蛋白复合体，YWHAH 既参与神经元发育与突触功能，也有助于维持整体蛋白稳态与信号传导的准确性。14-3-3 家族信号的失调与神经精神疾病和神经退行性表型相关，也与肿瘤生物学中生长与存活程序的异常有关，因此 YWHAH 是开展机制性通路研究的有用靶点。
14-3-3 η 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 YWHAH 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对YWHAH内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏YWHAH的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了YWHAH基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。