非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
12-LO 抗体 (C-5): sc-365194. 人血小板提取物中 12-LO 表达的近红外 Western 印迹分析. 使用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
12-LO双切口酶质粒(h): sc-403010-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- 12-LO 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- 12-LO双切酶质粒（h）和12-LO双切酶质粒（h2）编码针对ALOX12的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：12-LO: sc-365194，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
12-LO双切口酶质粒(h) | sc-403010-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
12-LO双切口酶质粒(h2) | sc-403010-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 ALOX12 基因编码 12-脂氧合酶（12-LO），这是一种非血红素铁型双加氧酶，可催化花生四烯酸加氧生成 12-过氧化二十碳四烯酸（12-HPETE），以及进一步产生塑造炎症信号传导的下游脂质介质。由 12-LO 生成的氧脂素（oxylipins）通过调控 MAPK、NF-κB 及相关类二十烷酸网络，影响血小板的激活与聚集、血管与上皮反应，以及氧化还原敏感过程。ALOX12 的活性还与脂质过氧化和细胞膜重塑通路交叉，进而影响细胞迁移、分化以及对氧化应激的应答。ALOX12/12-LO 信号失调与促炎状态以及代谢和心血管表型相关，因此值得在与疾病相关的细胞模型中进行研究。
12-LO 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ALOX12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ALOX12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ALOX12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ALOX12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。