β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406310
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β3Gn-T2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico β3Gn-T2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β3Gn-T2 Anticorpo (8G8): sc-134231
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406310 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
B3GNT2 codifica a β3Gn-T2 humana, uma β-1,3-N-acetilglucosaminiltransferase que alonga cadeias de poli-N-acetil-lactosamina (poliLacNAc) em N- e O-glicanos e em determinados glicolipídeos no interior do aparelho de Golgi. Ao modular a disponibilidade de arcabouços de glicanos para ramificações adicionais e modificações terminais (incluindo sialilação e fucosilação), a β3Gn-T2 influencia interações com lectinas, adesão célula–célula e o tráfego de receptores. Essa atividade de glicosilação integra-se às vias de biossíntese de glicanos que moldam a estabilidade de proteínas de membrana e a comunicação com a matriz extracelular. Alterações na expressão de poliLacNAc e em padrões de glicosilação associados à B3GNT2 têm sido relacionadas na literatura a mudanças no comportamento de células tumorais e no reconhecimento imune, dando suporte a estudos mecanísticos em modelos de câncer e imunologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β3Gn-T2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene B3GNT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do B3GNT2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do B3GNT2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β3Gn-T2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de B3GNT2 para a investigação da sinalização de β3Gn-T2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) B3GNT2 críticos para a função β3Gn-T2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos B3GNT2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus B3GNT2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo β3Gn-T2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR β3Gn-T2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia B3GNT2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo B3GNT2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.