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β2A Tubulin双切口酶质粒(h) | sc-400054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β2A Tubulin双切口酶质粒(h2) | sc-400054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBB2A 编码人类 β2A 微管蛋白,是 α/β-微管蛋白异二聚体的核心组成部分;这些异二聚体聚合形成微管,从而支撑细胞骨架结构、细胞内运输以及有丝分裂纺锤体的组装。微管的动态变化协调囊泡运输、细胞极性建立和染色体分离等过程,并与细胞周期调控及神经元形态发生通路相互整合。β-微管蛋白组成的改变或微管不稳定会扰乱神经发育程序,并与微管蛋白病(tubulinopathy)相关表型有关,包括皮层发育畸形和与癫痫相关的临床表现。作为一种高度保守的细胞骨架蛋白,β2A 微管蛋白也常用于研究人类细胞中依赖微管的信号传导机制与应激反应。
β2A Tubulin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TUBB2A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TUBB2A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TUBB2A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TUBB2A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。