β-1,3-Gal-T4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424825-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β-1,3-Gal-T4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase β-1,3-Gal-T4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase β-1,3-Gal-T4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para B3galt4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β-1,3-Gal-T4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424825-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **B3galt4** em camundongos codifica a **β-1,3-Gal-T4**, uma glicosiltransferase localizada no complexo de Golgi que catalisa etapas de **β1,3-galactosilação** importantes para a biossíntese de glicolipídios e glicoproteínas. Por seu papel na montagem de glicanos complexos, **B3galt4** contribui para a organização de microdomínios de membrana, o tráfego de receptores e processos de comunicação célula–célula que se cruzam com o metabolismo de glicosfingolipídios e com vias mais amplas de glicosilação. Padrões de glicosilação alterados são frequentemente associados a mudanças na função neuronal, na sinalização imune e nos fenótipos de células tumorais, tornando **B3galt4** um nó relevante para o estudo da regulação dependente do glicoma. Assim, a perturbação de **B3galt4** é útil para investigar como estruturas específicas de glicanos modulam a sinalização e a adesão em contextos celulares relevantes ao desenvolvimento e a doenças.
β-1,3-Gal-T4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus B3galt4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de B3galt4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função B3galt4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com B3galt4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.