α2A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419023
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α2A-AR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α2A-AR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α2A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419023 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adra2a codifica o α2A-AR murino, um receptor adrenérgico acoplado a Gi/Go que responde à norepinefrina e à epinefrina para inibir a adenilil ciclase e reduzir o cAMP intracelular. Por meio da sinalização de GPCR, o α2A-AR modula a atividade de canais iônicos, a liberação presináptica de neurotransmissores e programas de fosforilação a jusante dependentes de PKA, que moldam a transmissão sináptica e a excitabilidade neuronal. Em tecidos periféricos, o α2A-AR contribui para a regulação do tônus simpático e de respostas celulares controladas por catecolaminas. A desregulação da sinalização adrenérgica envolvendo ADRA2A tem sido associada a fenótipos neurocomportamentais e características cardiometabólicas, tornando esse receptor relevante para estudos da regulação do eixo do estresse e da fisiologia autonômica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α2A-AR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adra2a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adra2a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adra2a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α2A-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adra2a para a investigação da sinalização de α2A-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adra2a críticos para a função α2A-AR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adra2a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α2A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo α2A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adra2a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α2A-AR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR α2A-AR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adra2a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adra2a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.