α1B-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419020-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1B-ARO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α1B-AR (m) e o Plasmídeo Double Nickase α1B-AR (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adra1b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1B-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α1B-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adra1b codifica o receptor adrenérgico alfa1B do camundongo (α1B-AR), um receptor acoplado à proteína G para catecolaminas que se acopla principalmente a Gq/11 para ativar a fosfolipase Cβ, aumentando a sinalização por IP3/DAG, a mobilização de Ca2+ intracelular e a atividade da proteína quinase C. Por essas vias, regula o tônus do músculo liso vascular, a excitabilidade cardíaca e neuronal e a modulação da liberação de neurotransmissores, integrando entradas simpáticas com MAPK/ERK e outras cascatas de quinases. A sinalização do α1B-AR influencia programas transcricionais ligados ao crescimento celular e às respostas ao estresse, e alterações na função de receptores adrenérgicos têm sido associadas a fenótipos relevantes para hipertensão, remodelamento cardíaco e regulação neurocomportamental. Assim, modelos murinos de Adra1b dão suporte a estudos mecanísticos da sinalização adrenérgica em contextos cardiovasculares e do sistema nervoso.
α1B-AR O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adra1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adra1b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adra1b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adra1b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.