Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
α1A-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419021-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1A-ARO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α1A-AR (m) e o Plasmídeo Double Nickase α1A-AR (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adra1a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α1A-AR Anticorpo (4D8): sc-100291
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1A-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419021-NIC | 20 µg | $410.00 |
Adra1a codifica o receptor adrenérgico α1A de camundongo (α1A-AR), um receptor acoplado à proteína G que se acopla principalmente a Gq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase C, a produção de fosfatos de inositol, a mobilização de Ca2+ intracelular e a ativação de PKC. Por meio dessas vias, o α1A-AR regula o tônus do músculo liso, a reatividade vascular e a neurotransmissão simpática, e pode ativar a sinalização MAPK/ERK a jusante para influenciar a proliferação celular e respostas ao estresse. No sistema nervoso e em órgãos periféricos, a atividade de Adra1a integra sinais de catecolaminas com a função de canais iônicos e a maquinaria contrátil. A sinalização adrenérgica desregulada envolvendo o α1A-AR tem sido implicada em fenótipos cardiovasculares e autonômicos, bem como em papéis dependentes do contexto na neurofisiologia, tornando Adra1a um alvo útil para dissecar redes de sinalização dirigidas por GPCR.
α1A-AR O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adra1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adra1a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adra1a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adra1a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.