Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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α-S1-casein CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419847
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- α-S1-casein Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im α-S1-casein-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: α-S1-casein: sc-365929
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
α-S1-casein CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-419847 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Csn1s1 kodiert das murine α‑S1‑Casein, ein wichtiges sezerniertes Phosphoprotein der Milch, das von differenzierten mammären Epithelzellen synthetisiert und über den ER‑Golgi‑Sekretionsweg für den Export verpackt wird. Als Kernbestandteil der Caseinmizellen trägt α‑S1‑Casein zur Mizellenassemblierung sowie zum Calcium-/Phosphat‑Handling bei und unterstützt damit während der Laktation eine effiziente Nährstoffbereitstellung. Die Expression von Csn1s1 wird stark durch laktogene Hormone sowie nachgeschaltete JAK2/STAT5‑ und prolaktinresponsive Transkriptionsprogramme reguliert, die die Differenzierung der Milchdrüse koordinieren. Veränderungen in der Regulation von Casein‑Genen werden als Readout für den Zustand mammärer Epithelzellen, sekretorische Stressantworten und laktationsassoziierte Phänotypen genutzt, die für Forschungsmodelle in der Brustbiologie relevant sind.
Das α-S1-casein CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Csn1s1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Csn1s1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Csn1s1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die α-S1-casein-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Csn1s1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der α-S1-casein-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Csn1s1-Exone abzielen, die für die α-S1-casein-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Csn1s1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom α-S1-casein CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom α-S1-casein CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Csn1s1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das α-S1-casein HDR-Plasmid (m) und α-S1-casein HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Csn1s1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Csn1s1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.