Chemische Aktivatoren von V1RC20 können eine Kaskade von intrazellulären Ereignissen auslösen, die zu seiner Aktivierung über verschiedene Signalwege führen. cAMP, ein sekundärer Botenstoff, kann die Proteinkinase A (PKA) stimulieren, die dafür bekannt ist, Zielproteine zu phosphorylieren. Wenn PKA V1RC20 phosphoryliert, führt dies zur Aktivierung des Proteins. In ähnlicher Weise erhöht Forskolin den intrazellulären cAMP-Spiegel und aktiviert dadurch die PKA, die ihrerseits V1RC20 phosphorylieren und aktivieren kann. Adrenalin und Isoproterenol, die beide an beta-adrenerge Rezeptoren binden, können den cAMP-Spiegel in den Zellen erhöhen, was wiederum zur PKA-vermittelten Phosphorylierung von V1RC20 führt. Phorbol 12-Myristat 13-Acetat (PMA) aktiviert die Proteinkinase C (PKC), ein weiteres Enzym, das in der Lage ist, V1RC20 zu phosphorylieren, was auf eine Rolle bei der funktionellen Aktivierung dieses Proteins schließen lässt. Histamin führt über seine rezeptorvermittelte PKC-Aktivierung zur Produktion von IP3 und zur anschließenden Freisetzung von Kalziumionen. Dieser Anstieg des intrazellulären Kalziums kann PKC aktivieren, das dann möglicherweise V1RC20 phosphoryliert und aktiviert.
Zusätzlich zu diesen Wegen können auch andere Chemikalien V1RC20 über verschiedene Mechanismen aktivieren. Kalziumionen können Calmodulin aktivieren, das wiederum Kinasen wie CaMKII aktiviert. CaMKII hat die Fähigkeit, V1RC20 zu phosphorylieren, was zu seiner Aktivierung führt. Serotonin und Glutamat bewirken über ihre jeweiligen Rezeptoren einen Anstieg des intrazellulären Kalziums, wodurch PKC oder CaMKII aktiviert werden, was schließlich zur Phosphorylierung und Aktivierung von V1RC20 führt. Capsaicin und Nikotin bewirken durch die Stimulation ihrer jeweiligen Rezeptoren einen Kalziumeinstrom, der Kinasen aktiviert, die V1RC20 phosphorylieren können. Schließlich ist ATP für die Phosphorylierung unerlässlich, da es die Phosphatgruppen liefert, die Kinasen zur Phosphorylierung von Proteinen verwenden. Das Vorhandensein von ATP ist also entscheidend für die Aktivierung von Kinasen, die V1RC20 phosphorylieren und aktivieren können, was seine Rolle als indirekter Aktivator durch seine Beteiligung an kinase-vermittelten Phosphorylierungsprozessen unterstreicht.
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