ZFP106 Plasmide Double Nickase (h): sc-405869-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZFP106 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZFP106 Double Nickase Plasmid (h) e il ZFP106 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZNF106. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZFP106 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405869-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZFP106 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405869-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF106 codifica ZFP106, una proteina a dita di zinco implicata nel metabolismo dell’RNA nucleare e nella regolazione di programmi di espressione genica che sostengono l’omeostasi delle cellule neuronali e muscolari. ZFP106 è stata associata alla processazione dell’RNA e alla stabilità dei trascritti, collegandola a vie che coordinano la differenziazione, le risposte allo stress e il mantenimento di tipi cellulari a lunga vita. Studi genetici mettono in relazione la disfunzione di ZNF106 con fenotipi neuromuscolari e neurodegenerativi, in linea con ruoli nell’integrità dei motoneuroni e nel mantenimento del muscolo. Queste caratteristiche rendono ZNF106 un bersaglio utile per indagare come i fattori che gestiscono l’RNA influenzino la vulnerabilità cellulare e i cambiamenti trascrizionali associati alla degenerazione.
ZFP106 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNF106 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNF106. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNF106. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNF106 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.