Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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XTP3TPA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407430
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- XTP3TPA El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico XTP3TPA, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: XTP3TPA Anticuerpo (B-6): sc-398501
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
XTP3TPA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407430 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DCTPP1 codifica XTP3TPA, una pirofosfatasa citosólica de dCTP que hidroliza desoxinucleósidos trifosfato no canónicos para ayudar a mantener equilibradas las reservas de dNTP y el control de calidad de nucleótidos. Al limitar la incorporación de nucleótidos aberrantes en el ADN, XTP3TPA favorece la estabilidad del genoma, la fidelidad de la replicación y la coordinación de la reparación del ADN y de las respuestas al estrés replicativo. Las alteraciones del metabolismo de nucleótidos y el desequilibrio de las reservas de dNTP son características comunes de estados proliferativos y de la biología tumoral, lo que convierte a DCTPP1 en un nodo útil para estudiar los vínculos entre la depuración de nucleótidos, el daño oxidativo y la mutagénesis. El análisis funcional de DCTPP1 puede aportar información sobre los mecanismos que conectan la reprogramación metabólica con la señalización de daño en el ADN y el control del ciclo celular en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO XTP3TPA (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DCTPP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DCTPP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DCTPP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína XTP3TPA.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DCTPP1 para la investigación de la señalización de XTP3TPA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DCTPP1 críticos para la función de XTP3TPA
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DCTPP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido XTP3TPA CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido XTP3TPA CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DCTPP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR XTP3TPA (h) y el plásmido HDR XTP3TPA (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DCTPP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DCTPP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.