Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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XRCC4 Plasmide Double Nickase (m): sc-430821-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- XRCC4 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il XRCC4 Double Nickase Plasmid (m) e il XRCC4 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Xrcc4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: XRCC4 Antibody (G-10): sc-365118
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
XRCC4 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430821-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse Xrcc4 codifica XRCC4, una proteina scaffold centrale nella via del non-homologous end joining (NHEJ), che ripara le rotture a doppio filamento del DNA generate da radiazioni ionizzanti, stress ossidativo ed eventi di ricombinazione programmata. XRCC4 forma un complesso funzionale con la DNA ligasi IV e interagisce con XLF/NHEJ1 per allineare e ligare le estremità del DNA rotto, preservando così la stabilità del genoma e sostenendo una corretta progressione del ciclo cellulare. L’alterazione del sistema di giunzione delle estremità dipendente da XRCC4 compromette l’integrità cromosomica e aumenta la sensibilità allo stress genotossico, collegando la funzione di XRCC4 ai meccanismi alla base dell’instabilità genomica associata al cancro. Xrcc4 è inoltre rilevante per gli studi sullo sviluppo del sistema immunitario, poiché l’NHEJ è necessario per la ricombinazione V(D)J e la diversificazione dei geni dei recettori dell’antigene.
XRCC4 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Xrcc4 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Xrcc4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Xrcc4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Xrcc4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.