Xanthine Oxidase Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401185
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Xanthine Oxidase Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Xanthine Oxidase, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Xanthine Oxidase Antibody (A-3): sc-398548
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Xanthine Oxidase Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401185 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
La XDH umana codifica la xantina ossidasi, un enzima molibdeno-dipendente che catalizza le fasi terminali del catabolismo delle purine convertendo l’ipoxantina in xantina e la xantina in acido urico. Durante queste reazioni può generare specie reattive dell’ossigeno (ROS), collegando il metabolismo delle purine all’omeostasi redox e alla segnalazione dello stress ossidativo. L’attività della xantina ossidasi influenza la funzione endoteliale, le risposte infiammatorie e l’adattamento metabolico, e la sua disregolazione è stata associata a processi biologici legati all’iperuricemia, ai meccanismi di danno da ischemia–riperfusione e a vie ossidative rilevanti per le malattie cardiometaboliche. XDH è anche studiata nel contesto del metabolismo epatico e dell’equilibrio sistemico dell’azoto, dove un turnover delle purine alterato può rimodellare le risposte cellulari allo stress.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Xanthine Oxidase (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene XDH in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del XDH insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto XDH a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Xanthine Oxidase.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di XDH per lo studio della segnalazione di Xanthine Oxidase, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni XDH critici per la funzione di Xanthine Oxidase
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di XDH per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus XDH. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Xanthine Oxidase Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Xanthine Oxidase (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia XDH per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio XDH definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.