WDR59 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405648
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WDR59 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico WDR59, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WDR59 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405648 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
WDR59 (WD repeat domain 59) é uma proteína de sustentação (scaffolding) com repetições WD40 que atua como componente central do complexo GATOR2, um importante regulador a montante da sinalização de mTORC1. Por meio do GATOR2, a WDR59 contribui para vias de detecção de aminoácidos que controlam a ativação lisossomal de mTORC1, influenciando assim a síntese proteica, programas de crescimento responsivos a nutrientes e a autofagia. A perturbação da sinalização dependente de WDR59 pode remodelar o metabolismo celular e as respostas ao estresse, processos frequentemente investigados na biologia do câncer e em outras doenças associadas à desregulação da atividade de mTOR. Consequentemente, a WDR59 é rotineiramente estudada por seu papel em integrar a disponibilidade de nutrientes ao crescimento celular e à homeostase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO WDR59 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WDR59 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WDR59, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WDR59 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína WDR59.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WDR59 para a investigação da sinalização de WDR59, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WDR59 críticos para a função WDR59
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WDR59 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo WDR59 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo WDR59 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WDR59. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo WDR59 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR WDR59 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WDR59 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WDR59 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.