VDAC2 Plasmide Double Nickase (m): sc-423662-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- VDAC2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il VDAC2 Double Nickase Plasmid (m) e il VDAC2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Vdac2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
VDAC2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423662-NIC | 20 µg | $410.00 |
Vdac2 codifica per il canale anionico voltaggio-dipendente 2 (VDAC2), una porina principale della membrana mitocondriale esterna che regola lo scambio di metaboliti e ioni tra citosol e mitocondri. VDAC2 è un organizzatore chiave dell’omeostasi mitocondriale, influenzando la fosforilazione ossidativa, la segnalazione delle specie reattive dell’ossigeno e la permeabilità della membrana mitocondriale. Attraverso interazioni con le proteine della famiglia BCL-2, VDAC2 contribuisce al controllo dell’apoptosi intrinseca e alla dinamica mitocondriale, collegando la bioenergetica alle decisioni sul destino cellulare. La disregolazione delle vie associate a VDAC2 è stata implicata in contesti di metabolismo mitocondriale alterato, risposte allo stress e suscettibilità alla morte cellulare, aspetti ampiamente rilevanti per la biologia del cancro, la neurodegenerazione e la ricerca cardiometabolica.
VDAC2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Vdac2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Vdac2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Vdac2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Vdac2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.