USF-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423628

Descripción general

El factor de transcripción upstream 1 (USF-1), codificado por el gen murino *Usf1*, es un factor de transcripción de tipo hélice-bucle-hélice básica con cremallera de leucina que se une a motivos E-box para coordinar programas de expresión génica que controlan el metabolismo, el crecimiento y las respuestas al estrés. USF-1 integra señales para regular redes transcripcionales implicadas en la homeostasis de lípidos y glucosa, la función mitocondrial y la progresión del ciclo celular, a menudo mediante interacciones con correguladores y complejos modificadores de la cromatina. En sistemas murinos, la actividad alterada de *Usf1* se ha asociado con fenotipos metabólicos desregulados y señalización inflamatoria relevantes para estudios de rasgos cardiometabólicos y de la regulación génica hepática. Como regulador transcripcional de amplia expresión, USF-1 se examina con frecuencia por sus funciones en el control transcripcional, la comunicación entre potenciadores y promotores, y el crosstalk entre vías que subyace a la susceptibilidad a enfermedades complejas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO USF-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Usf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Usf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Usf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USF-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Usf1 para la investigación de la señalización de USF-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Usf1 críticos para la función de USF-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Usf1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido USF-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido USF-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Usf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USF-1 (m) y el plásmido HDR USF-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Usf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Usf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.