SMCR7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406975
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SMCR7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SMCR7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SMCR7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406975 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MIEF2 codifica a proteína fator de elongação mitocondrial 2 (SMCR7/MiD51), um adaptador da membrana mitocondrial externa que regula a fissão mitocondrial ao recrutar e organizar a GTPase DRP1. Ao controlar a arquitetura da rede mitocondrial, MIEF2 influencia a eficiência da fosforilação oxidativa, o equilíbrio de espécies reativas de oxigênio e vias de controle de qualidade mitocondrial, como a mitofagia, impactando assim o metabolismo celular e as respostas ao estresse. Alterações na atividade de MIEF2 têm sido associadas à desregulação da dinâmica mitocondrial observada em neurodegeneração, disfunção cardiometabólica e reprogramação metabólica relacionada ao câncer. Como um nó que conecta a morfologia da organela à sinalização bioenergética, MIEF2 é frequentemente investigado em estudos sobre suscetibilidade à apoptose, sinalização imune inata a partir das mitocôndrias e adaptação à hipóxia ou ao estresse por falta de nutrientes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SMCR7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MIEF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MIEF2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MIEF2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SMCR7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MIEF2 para a investigação da sinalização de SMCR7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MIEF2 críticos para a função SMCR7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MIEF2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SMCR7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SMCR7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MIEF2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SMCR7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SMCR7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MIEF2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MIEF2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.