SLC35A3 Plasmide Double Nickase (h): sc-417814-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35A3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35A3 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35A3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35A3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35A3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417814-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35A3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417814-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A3 codifica un trasportatore di zuccheri nucleotidici associato all’apparato di Golgi e al reticolo endoplasmatico (RE), che importa UDP-N-acetilglucosamina nel lume per supportare la glicosilazione N-legata, la glicosilazione O-legata e la biosintesi dei glicolipidi. Controllando la disponibilità di substrati per le glicosiltransferasi, SLC35A3 influenza il ripiegamento e il traffico delle proteine, nonché la composizione dei glicani sulla superficie cellulare, che modulano la segnalazione dei recettori e le interazioni cellula–cellula. L’alterazione del trasporto di UDP-GlcNAc può perturbare la proteostasi e le vie dipendenti dai glicani, collegando SLC35A3 ai disordini congeniti della glicosilazione e a fenotipi più ampi che coinvolgono il neurosviluppo e l’omeostasi metabolica. Il suo ruolo centrale nell’asse esosamina/glicosilazione lo rende inoltre rilevante per studiare come il sensing dei nutrienti si accoppi al rimodellamento dei glicani nelle cellule umane.
SLC35A3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35A3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35A3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35A3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35A3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.