Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
SLC26A3 Plasmide Double Nickase (h): sc-403891-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC26A3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC26A3 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC26A3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC26A3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SLC26A3 Antibody (H-8): sc-376187
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC26A3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403891-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC26A3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403891-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **SLC26A3** codifica un trasportatore di anioni di membrana (DRA) che media uno scambio elettroneutro cloruro/bicarbonato e contribuisce all’assorbimento di elettroliti nell’epitelio intestinale e all’omeostasi del pH luminale. Attraverso la regolazione del flusso ionico transepiteliale, **SLC26A3** interagisce con processi che governano l’equilibrio dei fluidi, la stabilità dello strato di muco e la funzione di barriera dell’epitelio nel tratto gastrointestinale. Un’alterata attività di **SLC26A3** è associata alla diarrea cloridrica congenita ed è stata implicata in meccanismi più ampi di disregolazione epiteliale, inclusi contesti infiammatori e neoplastici del colon. In quanto trasportatore in grado di influenzare i microambienti ionici locali, **SLC26A3** è rilevante per studi sulla differenziazione degli enterociti, sulle reti di trasportatori e sulla segnalazione accoppiata agli ioni.
SLC26A3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC26A3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC26A3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC26A3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC26A3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.