SerpinA9 Plasmide Double Nickase (h): sc-415475-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SerpinA9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SerpinA9 Double Nickase Plasmid (h) e il SerpinA9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SERPINA9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SerpinA9 Antibody (913G2V): sc-517654
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SerpinA9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-415475-NIC | 20 µg | $410.00 |
SERPINA9 codifica SerpinA9, un membro della superfamiglia degli inibitori delle proteasi seriniche (serpine) che contribuisce a modellare la proteolisi extracellulare modulando l’attività delle proteasi nei microambienti tissutali. Il controllo, mediato dalle serpine, delle cascate di proteasi contribuisce a processi quali il rimodellamento della matrice extracellulare, la migrazione cellulare e le dinamiche delle cellule immunitarie, collegando SERPINA9 a vie che influenzano la segnalazione infiammatoria e la regolazione, dipendente dalle proteasi, della comunicazione cellulare. Sono stati riportati pattern di espressione alterati di SERPINA9 in contesti linfoidi, a supporto della sua rilevanza per studi sulla biologia delle cellule B, sulle interazioni nel microambiente tumorale e sulla disregolazione associata al sistema immunitario. In quanto gene umano codificante una proteina con espressione associata a specifici tessuti e linee cellulari, SERPINA9 è frequentemente oggetto di analisi trascrittomiche e di genomica funzionale per chiarirne il ruolo nell’equilibrio delle proteasi e nell’omeostasi immunitaria.
SerpinA9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SERPINA9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SERPINA9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SERPINA9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SERPINA9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.