SERF1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-422894

Panoramica

Serf1 codifica il small EDRK-rich factor 1 (SERF1), una proteina altamente conservata e intrinsecamente disordinata, implicata nella proteostasi e in processi associati all’RNA. SERF1 è stata collegata alla modulazione delle dinamiche di aggregazione proteica e delle risposte allo stress cellulare, con interazioni riportate che influenzano la funzione nucleolare e il metabolismo dell’RNA. Nei sistemi murini, Serf1 viene studiata per il suo contributo all’omeostasi neuronale e dello sviluppo, ambiti in cui reti di proteostasi alterate sono rilevanti per la neurodegenerazione e per altri fenotipi associati al misfolding proteico. Le perturbazioni di Serf1 con perdita o acquisizione di funzione supportano studi meccanicistici che collegano vie dei chaperoni, organizzazione delle ribonucleoproteine e proteine inclini all’aggregazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SERF1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Serf1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Serf1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Serf1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SERF1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Serf1 per lo studio della segnalazione di SERF1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Serf1 critici per la funzione di SERF1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Serf1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SERF1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SERF1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Serf1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SERF1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SERF1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Serf1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Serf1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.