Sec61α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424716
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sec61α1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sec61α1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sec61α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424716 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sec61a1 codifica a Sec61α1, a subunidade central formadora do poro do translocon Sec61 na membrana do retículo endoplasmático (RE), que medeia a importação cotraducional e pós-traducional de proteínas secretoras e de membrana. Ao acoplar o ancoramento do ribossomo à translocação e à integração do peptídeo, a Sec61α1 sustenta a biogênese proteica, o controle de qualidade no RE e vias de proteostase, incluindo a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e a degradação associada ao RE (ERAD). A perturbação da função do canal SEC61 tem sido associada a defeitos na homeostase da via secretora e nas respostas celulares ao estresse, processos frequentemente implicados em modelos de inflamação, disfunção metabólica e neurodegeneração. Em sistemas murinos, Sec61a1 oferece um ponto de entrada acessível para estudar como a capacidade de importação no RE molda a sinalização, a diferenciação e a sobrevivência sob estresse proteotóxico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sec61α1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sec61a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sec61a1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sec61a1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sec61α1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sec61a1 para a investigação da sinalização de Sec61α1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sec61a1 críticos para a função Sec61α1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sec61a1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sec61α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sec61α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sec61a1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sec61α1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sec61α1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sec61a1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sec61a1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.