SARP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424898
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SARP3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SARP3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SARP3 Anticorpo (H-6): sc-374397
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SARP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424898 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sfrp5 codifica a SARP3, uma proteína secretada relacionada à frizzled que modula a disponibilidade extracelular de ligantes Wnt e ajusta finamente a sinalização Wnt/β-catenina e a sinalização Wnt não canônica. Ao moldar as interações receptor–ligante na superfície celular, a SARP3 influencia a especificação do destino celular, a proliferação e a remodelação tecidual durante o desenvolvimento e na homeostase do adulto. Em modelos murinos, alterações na atividade de Sfrp5 têm sido associadas à desregulação da biologia do tecido adiposo, à inflamação e a fenótipos metabólicos, tornando-o relevante para estudos de sensibilidade à insulina e balanço energético. Sua natureza secretada também posiciona a SARP3 como um nó-chave na sinalização parácrina em microambientes estromais–imunes–epiteliais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SARP3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sfrp5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sfrp5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sfrp5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SARP3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sfrp5 para a investigação da sinalização de SARP3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sfrp5 críticos para a função SARP3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sfrp5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SARP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SARP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sfrp5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SARP3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SARP3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sfrp5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sfrp5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.