RPGRIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412755-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RPGRIP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RPGRIP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RPGRIP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RPGRIP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RPGRIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412755-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RPGRIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412755-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RPGRIP1 (proteína 1 que interage com o regulador de GTPase RPGR, associada à retinite pigmentosa) codifica uma proteína da zona de transição ciliar que atua como plataforma de ancoragem para o RPGR e outros componentes necessários para a integridade do cílio conetor dos fotorrecetores e para o tráfego de proteínas até ao segmento externo. Contribui para a organização do centrossoma/corpo basal e apoia a montagem e a manutenção do cílio primário, ligando a dinâmica do citoesqueleto à função de “porta” do cílio. Processos dependentes de RPGRIP1 cruzam-se com vias de sinalização mediadas por cílios ao regularem a compartimentalização de recetores e da maquinaria de transporte. Alterações genéticas em RPGRIP1 estão associadas a degenerações hereditárias da retina, incluindo a amaurose congénita de Leber e a retinite pigmentosa, tornando-o um alvo-chave para modelar disfunção ciliar em células humanas.
RPGRIP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RPGRIP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RPGRIP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RPGRIP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RPGRIP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.