RBM15 Plasmide Double Nickase (h): sc-417289-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RBM15 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RBM15 Double Nickase Plasmid (h) e il RBM15 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RBM15. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RBM15 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM15 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM15 (RNA binding motif protein 15) è un fattore nucleare legante l’RNA che regola l’espressione genica post-trascrizionale controllando lo splicing alternativo, la stabilità dell’RNA e l’esportazione dell’mRNA. Agisce in complessi ribonucleoproteici ed è stato associato a processi epigenetici e legati alle modificazioni dell’RNA, inclusa la modulazione del metabolismo dell’RNA dipendente da m6A tramite interazioni con componenti fondamentali del complesso “writer”. RBM15 contribuisce alla specificazione di linea e ai programmi ematopoietici, e la deregolazione del processamento dell’RNA associato a RBM15 è stata implicata in reti trascrizionali oncogeniche, incluse riarrangiamenti cromosomici che coinvolgono RBM15 nelle leucemie acute. Questi ruoli rendono RBM15 un bersaglio utile per analizzare l’accoppiamento tra processamento dell’RNA e transizioni dello stato cellulare in sistemi modello umani.
RBM15 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RBM15 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RBM15. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RBM15. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RBM15 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.