Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
OAS3 Plasmide Double Nickase (m): sc-434225-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OAS3 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OAS3 Double Nickase Plasmid (m) e il OAS3 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Oas3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: OAS3 Antibody (D-7): sc-398225
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OAS3 Plasmide Double Nickase (m) | sc-434225-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene Oas3 del topo codifica la 2′-5′-oligoadenilato sintetasi 3 (OAS3), un sensore citosolico inducibile dagli interferoni dell’RNA virale a doppio filamento, che catalizza la produzione di 2-5A per attivare RNasi L e promuovere la degradazione dell’RNA virale e cellulare. Questo asse OAS3–RNasi L si integra con la segnalazione dell’interferone di tipo I, la restrizione immunitaria innata e il controllo della traduzione associato allo stress, plasmando le risposte antivirali e gli esiti infiammatori. Un’alterata regolazione dell’attività della famiglia OAS è stata collegata a programmi interferonici disfunzionali e a patologie immuno-mediate, rendendo OAS3 un utile punto di ingresso per analizzare le interazioni ospite–patogeno e le dinamiche della segnalazione immunitaria innata nei modelli murini.
OAS3 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Oas3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Oas3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Oas3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Oas3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.