Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NOD9 Plasmide Double Nickase (h): sc-402937-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NOD9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NOD9 Double Nickase Plasmid (h) e il NOD9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NLRX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NOD9 Antibody (F-2): sc-374514
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NOD9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402937-NIC | 20 µg | $410.00 |
NLRX1 (nota anche come NOD9) è un recettore di tipo NOD localizzato nei mitocondri che modula la segnalazione dell’immunità innata e le risposte cellulari allo stress. Interagendo con MAVS e adattatori correlati, NLRX1 può regolare finemente le vie dei recettori di tipo RIG-I, l’attività di NF-κB e la produzione di interferoni di tipo I, influenzando al contempo la generazione di specie reattive dell’ossigeno e l’omeostasi mitocondriale. È stata implicata nella regolazione dell’autofagia e di programmi di segnalazione infiammatoria che plasmano le interazioni ospite–patogeno e l’equilibrio immunitario specifico dei tessuti. Un’attività deregolata di NLRX1 è spesso studiata nel contesto dell’infiammazione cronica, della biologia delle malattie infettive e di meccanismi immuno-associati rilevanti per il cancro e i disturbi metabolici.
NOD9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NLRX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NLRX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NLRX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NLRX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.