Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MyD88 Plasmide Double Nickase (h): sc-417166-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MyD88 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MyD88 Double Nickase Plasmid (h) e il MyD88 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MYD88. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MyD88 Antibody (E-11): sc-74532
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MyD88 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417166-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MyD88 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417166-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYD88 codifica la proteina 88 della risposta primaria di differenziamento mieloide (MyD88), un adattatore essenziale che collega i recettori Toll-like e i membri della famiglia del recettore dell’interleuchina-1 alla segnalazione a valle. Attraverso il reclutamento delle chinasi IRAK e di TRAF6, MyD88 promuove l’attivazione delle vie di NF-κB e MAPK, modellando i programmi trascrizionali dell’immunità innata e la produzione di citochine infiammatorie. La segnalazione dipendente da MyD88 regola l’attivazione delle cellule immunitarie, le risposte antimicrobiche e il crosstalk con le vie associate all’interferone e all’inflammasoma. Un’attività di MYD88 deregolata e varianti ricorrenti di MYD88 sono implicate in fenotipi infiammatori e nella segnalazione associata alle neoplasie delle cellule B, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico nella ricerca in immunologia e biologia del cancro.
MyD88 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MYD88 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MYD88. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MYD88. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MYD88 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.