Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
MAS1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401674-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MAS1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MAS1 Double Nickase Plasmid (h) e il MAS1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MAS1 Antibody (G-1): sc-390453
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MAS1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401674-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAS1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401674-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAS1 codifica il proto-oncogene Mas1, un recettore accoppiato a proteine G a sette domini transmembrana che funge da effettore chiave del braccio protettivo del sistema renina–angiotensina attraverso il legame con l’angiotensina-(1–7). La segnalazione mediata da MAS1 coinvolge le vie dell’ossido nitrico e delle prostaglandine, modula in modo dipendente dal contesto le cascate MAPK e PI3K/AKT e influenza il tono vascolare, le risposte infiammatorie e il rimodellamento tissutale. Nelle cellule umane, l’attività di MAS1 è stata associata alla regolazione della funzione endoteliale, a programmi di segnalazione legati alla fibrosi e all’omeostasi neurocardiovascolare. Un’espressione alterata di MAS1 o uno squilibrio delle sue vie di segnalazione sono stati studiati nella patobiologia cardiovascolare e renale, nonché in fenotipi proliferativi e invasivi descritti in diversi contesti tumorali.
MAS1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.